1、菌种选择
香菇品种类型较多，常用的为中低温型。这类香菇发菌的最适环境条件是气温24～27℃，培养料含水量60%左右，无光或弱光。出菇期最适环境条件是气温8～16℃，空气新鲜、潮湿，三分阳七分阴。实际选择菌种时，可选择中温型的856、CrO2、L26等。每瓶菌种要求无杂菌，无害虫，种性纯，菌丝生长健壮。
2、培养料配制
培养料的组成包括杂木屑、麸皮或米糠、糖、石膏粉、尿素、过磷酸钙等。杂木屑是香菇菌丝的主要碳源物质，可用锯木厂的阔叶树锯屑，也可用阔叶树的残次废材和枝桠的粉碎物；麸皮或米糠是香菇的主要供氮物质，应选用无霉变的新鲜料；糖是供菌丝生长发育前期吸收利用的速效性碳源，白糖、红糖均可；石膏粉则既可提供钙素，又可延缓培养料的酸化过程；尿素和过磷酸钙分别为氮肥和磷肥，提供氮、磷、钙等营养物质。培养料的配方为杂木屑77%、麸皮或米糠20%、糖1.2%、石膏1.8%，或杂木屑78%、麸皮16%、玉米粉2%、石膏2%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、糖1.2%。将可溶性的尿素、过磷酸钙、糖等先溶于水中，其它粉末状物干拌后合在一起，边加水边拌料，反复多次。加水至手捏能成团，触之能散的程度，此时含水量约为60%左右。
3、灭菌
将折径15cm、厚0.04mm的低压聚乙烯筒膜截成55cm长的筒料，一端封口。将培养料装入塑料筒袋内，每袋重0.9kg(干料)左右，扎口后放入常压灭菌灶。灶内中心留一定空间，促使蒸汽均匀分布，提高灭菌效果。旺火加温，锅内温度升至100℃时，改用文火，持续10～12小时后停止加温，降温至70℃左右时出料。
4、接种
待培养料筒冷却到28℃以下时，连同酒精灯、接种箱、打孔器、接种耙等接种工具等用品，先经0.25%新洁尔灭溶液表面消毒，然后搬入接种箱，每立方米空间加福尔马林10ml，高锰酸钾5g混合，关闭玻璃窗、操作孔，熏蒸半小时，可使微生物细胞蛋白质凝固变质而死亡。之后接种人员用75%酒精擦洗双手，伸入接种箱内边打孔边接种，并同时贴好胶布。这一过程要求动作快，持续时间短。胶布可用食用菌专用胶布或医用胶布，大小为3.5cm×3.5cm。
