1.营养 鸡腿菇能够利用相当广泛的碳源，木糖、葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、棉籽糖、甘露糖、淀粉、纤维素、石蜡都能利用。利用木糖比葡萄糖差，利用乳糖果相当好，某些菌株利用半乳糖和乳糖好于利用甘露醇、葡萄糖、果糖；利用软石蜡能力很差。蛋白胨和酵母粉（自溶物）是鸡腿菇最好的氮源，鸡腿菇能利用各种铵盐和硝态氮，但无机氮和尿素都不是最适的氮源。在麦芽汁培养基中加入天门冬酰胺、蛋白胨、尿素，菌丝生长更好。 缺少硫胺素时鸡腿菇生长受影响。在培养基中加入含有维生素B1的天然基质麦芽浸膏、玉米、燕麦、豌豆、扁豆、红甜菜、野豌豆、红三叶草、苜蓿等绿叶的煎汁，可以大大促进鸡腿菇的菌丝生长。
2.温度 鸡腿菇菌丝的生长温度为3~35℃，最适生长温度为22～28℃。鸡腿菇菌丝的抗寒能力相当强，据报道，冬季―30℃时，土中的鸡腿菇菌丝可以安全越冬。温度低，菌丝生长缓慢，呈稀、细、绒毛状；温度高，菌丝生长快，35℃以上菌丝发生自溶现象。子实体的生长温度为8～30℃，最适生长温度为12～18℃。温度低，子实体发育慢，个头大，像鸡腿；20℃以上，菌柄易伸长，菌盖变小变薄，品质降低，极易开伞自溶。
3.湿度 鸡腿菇培养料的含水量以60%～70%为宜。发菌期间空气相对湿度80%左右。子实体发生时，空气相对湿度85%～95%，低于60%菌盖表面鳞片反卷；湿度95%以上，菌盖易得斑点病。
4.空气 鸡腿菇菌丝长和子实体生长发育都需要新鲜空气。
5.光照 鸡腿菇菌丝长阶段不需要光照，菇蕾分化和子实体发育生长需要50～1000勒的光照。
6.酸碱度 鸡腿菇菌丝能在pH 2～10的培养基中生长，以pH 7为最适。
7.其他 鸡腿菇子实体的形成，需要覆土刺激，不覆土不出菇。
