接种前准备好相应数量的菌种，使用前将菌种表面用75%酒精擦拭消毒，然后备用。
菌包接种
菌包接种可采用接种箱模式，将冷却至30℃以下的菌包放入接种箱中，进行气雾消毒，烟雾散尽后开始接种。接种量以填满菌包中间插棒孔为准，每个菌种可接40～60包；用棉花塞住接种口。接种时接种人员要求戴消毒乳胶手套，先将菌种表面的老皮去除，用接种勾将菌种送入接种口，落在接种口附近的菌种不要送入接种口内，操作要求迅速。
菌段接种
菌段接种适合采用接种机进行，为确保接种成功率，在接种前将接种机顶部和侧面用玻璃罩封闭，仅保留正面和一个侧面进行接种操作。木段接种采用两头接种模式，每个接种机2个人配合操作，一人负责解开袋口和封闭袋口，一人负责将菌种送入菌袋内。送接种的操作人员需注意将菌种用接种工具破碎，送入菌袋的两头和侧面以及木块之间的缝隙中；解袋和封口人员需注意操作迅速，尽量减少菌袋开口时间，减少杂菌污染的机会。
